产生皱纹是皮肤衰老的特征之一。研究表明，人们提出了很多衰老学说，其中活性氧自由基学说是较多支持的学说。

人体正常生理代谢和环境影响，如紫外线照射、环境污染等，都会导致活性氧（ROS）的产生，过量的自由基会导致皮肤衰老等问题产生。减少自由基的产生和清除老化代谢物是减缓皮肤衰老以及皱纹产生的方法之一


化妆品抗皱功效测试方法分为人体法和体外法两大类，而体外法有生物化学法、细胞法、表皮模型法、斑马鱼胚胎法等。其中生物化学法使用相对便捷、成本低、易于实现、速度快，可用于抗皱原料的高通量筛选。如DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、超氧阴离子自由基清除法等。

一、DPPH自由基清除法

DPPH乙醇溶液呈紫红色，在519 nm处有最大吸收波长。当加入自由基清除剂时，DPPH自由基被清除，溶液逐渐变浅，在519 nm 处的吸光度随之减小。溶液颜色越浅，其吸光度值越低，自由基清除剂清除DPPH自由基的效果越好。

二、ABTS自由基清除法

ABTS与过硫酸钾反应生成绿色的ABTS+。具有抗氧化性的物质可抑制ABTS+的生成，ABTS+在可见光区最大吸收峰734 nm处，测定吸光度，其光度值的大小可定量得出反应物质的自由基清除能力。即其吸光度值越低，具有抗氧化性的物质清除ABTS自由基的能力越强。

三、超氧阴离子自由基清除法

邻苯三酚在碱性条件下能迅速发生氧化链式反应，释放出超氧阴离子自由基（O2—），O2—进一步加速邻苯三酚的氧化，生成在320 nm 处有特殊吸收的中间产物。若在反应体系中加入抗氧化物，可清除O2—，阻止中间产物的积累，使得在320 nm处的吸光度减小。

四、羟自由基清除法

水杨酸与羟自由基（·OH）反应生成可 2,3- 二羟基苯甲酸，它在 510 nm处有最大吸收波长。利用过氧化氢（H2O2）与七水硫酸亚铁（FeSO4·7H2O反应生成·OH，加入具有清除自由基能力的物质，可抑制2,3-二羟基苯甲酸生成，降低 510 nm 处的吸光度。

自由基清除剂或抗氧化剂可以提供电子、抑制氧化。通过吸收自由基的同时，细胞不受攻击，达到清除自由基目的，减少皱纹的产生，从而达到减缓皮肤的衰老过程，化妆品的成品、半成品和原料可以通过上述实验确定其是否具有清除自由基的能力及其能力的强弱。

以上几种方法可以计算样品清除自由基的清除率，以及计算其半数清除浓度（IC50）。通过进行不同样品的自由基清除能力比较可知，IC50值越小，代表该样品的清除自由基能力越强，从而比对出不同化妆品成品、半成品或原料清除自由基的能力。

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