随着高效液相色谱仪（HPLC）的快速发展，越来越多的化妆品企业都配置有一定数量的HPLC。无论是原料鉴别、质控，抑或是限、禁用物质的定性定量检测，都发挥着至关重要的作用。

本期我们来了解HPLC重要的核心之一：色谱之眼——检测器。

检测器的作用

Function of detector

随时间推移，样品组分在经过色谱柱有效分离后，在经过检测器时，会产生特定的信号，检测器将之转换、放大为可供检测的信号，由数据记录系统记录下来，形成色谱图，从而定性、定量分析待测组分。毫不夸张地说，没有检测器，HPLC就是一个“瞎子”，任何物质从其面前经过，也只能熟视无睹。

不同的检测器其使用范围有所不同，因此需要掌握不同检测器的原理。

液相色谱常用的检测器包括：紫外检测器（UVD或DAD/PDA/PDAD）、荧光检测器（FLD）、示差折光检测器（RID）、蒸发光散射检测器（ELSD）、质谱检测器（MSD）等。

紫外检测器

UV detector

是目前液相色谱中应用最广泛的检测器。自然界中大部分有机物和部分无机物都具有紫外吸收能力，紫外检测器根据化合物对紫外光的吸收能力，从而进行分析。现在经常能听到的紫外检测器（UVD）、光电二极管阵列检测器（DAD，也称PDA、PDAD），都是基于这个原理。

它有两个流通池，一个参比，一个测量。光源发出的紫外光照射到流通池上，若两个流通池都通过纯的均匀溶剂，则它们在紫外波长下几乎无吸收，光电管上接受到的辐射强度相等，无信号输出；当组分进入测量池时，吸收一定的紫外光，使两光电管接受到的辐射强度不等，这时有信号输出，输出信号大小与组分浓度有关。

许多紫外检测器光源采用的是氘灯，使用范围一般是190-800nm，开发方法时，需要考虑化合物的最大吸收波长，同时应避开流动相的吸收干扰来选择合适的检测波长。

荧光检测器

Fluorescence detector

适用于能激发荧光的化合物。很多与生命科学有关的物质，如氨基酸、胺类、维生素、甾族化合物及某些代谢药物都可以用荧光法检测。荧光检测器在生物样品痕量分析中具有重要作用。

但由于自然界中，能够产生荧光的物质较少，相当一部分物质需要进行荧光衍生后，才可以进行检测（如微量的肽和氨基酸）。样品的局限导致其应用受限，但FLD灵敏度极高，让其在检测方面发挥着至关重要的作用。

示差折光检测器

Differential refractometer

通用型检测器，利用物质的折光效应，对所有物质均有响应，只要被测组分与洗脱液的折光指数有差别就可使用。各类糖类化合物、脂肪烷烃等，因没有紫外吸收，一般常用示差折光检测器。

它的通用性比UVD广，但灵敏度要低。与FLD相似，RID也有“短板”——对温度变化敏感，是所有检测器中对温度要求最高的，同时还不能采用梯度洗脱。因为任何使流动相比例发生改变的因素，都会引起基线的持续变化且难以平衡，这也限制了RID的使用。

蒸发光散射检测器

Evaporative light scattering detector

一种通用型的检测器，原理是利用光散射效应，可检测挥发性低于流动相的样品，通过雾化器去除溶剂，让化合物形成悬浮颗粒，从而形成散射效应。ELSD灵敏度比RID高，对温度变化不敏感，基线稳定，可用于梯度洗脱，但不能使用不挥发的盐类溶剂，而要用醋酸铵之类的挥发性缓冲盐来代替。目前，ELSD已被广泛应用于碳水化合物、类脂、脂肪酸、药物以及聚合物等的检测。

质谱检测器

Mass spectrometer detector

通用型检测器，液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）就是应用了MSD，在灵敏度、选择性、通用性及化合物的分子量和结构信息的提供等方面都有突出的优点。但它的昂贵操作费用和复杂性在一定程度上限制了它的推广应用。

由此可见，作为HPLC核心之一的检测器，充当着“眼睛”，发挥着极其重要的作用。如果检测器不合适，再优秀的前处理、柱分离技术，也无法完成检测任务。

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